教学研讨

高考中有关显色试剂考查概要

来源:    时间:2009-02-22    已阅读2669次
 闫 锋 (西安高新第一中学高中部  710075)
 
一、试剂总结:
  
主要成分及配制
    
     
   
碘液
KI、I2
 
配制:将2g碘化钾放入5ml蒸馏水中,加热溶解后再加入1g碘,加蒸馏水稀释至300ml)
1“光合作用”实验中,用于鉴定淀粉的生成(教材第一册P52);
2“温度对酶活性的影响”实验中,用于鉴定淀粉是否分解(教材第三册P8)。
多数淀粉是由20%~25%的直链淀粉和75%~80%的支链淀粉组成。直链淀粉借助分子内部的氢链卷曲成螺旋状。I2会嵌入到螺旋结构的空隙处,并形成一种稳定的淀粉—碘络合物。这种淀粉—碘络合物能够比较均匀地吸收除了蓝光以外的长波光,从而使淀粉呈现蓝色。
1直链淀粉初步水解得到的糊精分子仍较大,遇碘显蓝色,继续水解得分子较小的糊精,遇碘显红色,再水解变成分子更小的无色糊精,遇碘不显色。
2支链淀粉遇碘产生紫红色。
双缩脲试剂
A液:2ml质量浓度0.1g/mlNaOH;
 
B液:3~4滴质量浓度0.01g/mlCUSO4
在“生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定”实验中,作为鉴定生物组织中蛋白质的存在(教材第一册P17)。
在浓碱溶液中,双缩脲(NH2—CO—NH—CO—NH2)与硫酸铜结合生成紫色或紫红色的复合物。
蛋白质分子中含有多个与双缩脲结构类似的肽键。
1使用时先加入A液摇匀后,再加入B液。
2凡有两个或两个以上的肽键结构的化合物都有此反应,故也可用于鉴定肽的存在。
二苯胺
A液:1.5g二苯胺溶于100ml冰醋酸中,再加1.5ml浓硫酸,用棕色瓶保存。
 
B液:乙醛的体积分数为0.2%的溶液。
 
配制:将0.1mlB液加入到10mlA液中,现配现用。
在“DNA的粗提取与鉴定” 实验中,作为鉴定DNA的试剂(教材第二册P6)。
DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω—羟基—γ酮基戊醛,它再和二苯胺作用而显现蓝色(液体呈浅蓝色)。鉴定时溶液蓝色的深浅与溶液中DNA含量有关。
可用于鉴定脱氧核糖、脱氧核糖核苷酸的存在。
伊红美蓝
伊红;美蓝
用以鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌(教材第三册P80~81)。
大肠杆菌代谢产物(有机酸)可与伊红和美蓝结合,使菌落呈深紫色,并带有金属光泽。
一般加入培养基中,做成鉴定培养基。
斐林试剂
甲液:2ml质量浓度0.1g/mlNaOH;
 
乙液:4~5滴质量浓度0.05g/mlCUSO4
 
配制:将4~5滴乙液滴入2ml甲液,配制而成。
1在“生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定”实验中,作为鉴定生物组织中还原糖的存在(教材第一册P17)。
2在“探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用”实验中,作为判断淀粉、蔗糖是否水解的指示剂(教材第一册P47)。
NaOH与CUSO4混合后,立即生成淡蓝色的CU(OH)2沉淀,CU(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的CU2O沉淀,而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。
用斐林试剂鉴定还原性糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色。
斐林试剂极不稳定,其甲液和乙液需分别配制储存,使用时再临时混合。
班氏试剂
柠檬酸钠、无水碳酸钠、CuSO4
 
配制:取柠檬酸钠86.5g和无水碳酸钠50g放入1000ml锥形瓶中,加水350ml,加热溶解。另取100ml锥形瓶加入硫酸铜8.65g,加水约50ml,加热溶解。待两者冷却至室温,将硫酸铜溶液慢慢倒入前液,同时搅匀,并补足水量至500ml。
在“尿糖的测定” 实验中,作为测定尿糖含量的指示剂(教材第三册P12)。
硫酸铜与硫酸钠和柠檬酸钠相遇,能产生出一种可溶性的又能离解出Cu2+的可溶性络盐,即柠檬酸钠此时能防止氢氧化铜沉淀的形成,做了一种亲水性掩蔽络合物形成剂。当利用班氏试剂测定还原性糖时,还原性糖在这种碱性溶液中能将Cu2+还原为Cu+,Cu+ 再与OH-合成黄色的CuOH,加热后 CuOH即变成砖红色的Cu2O沉淀。
班氏试剂较稳定,配制好以后可较长时间保存。
龙胆紫
龙胆紫
 
配制:将龙胆紫溶解在质量分数为2%的醋酸溶液中配制而成。
在“观察植物细胞有丝分裂” 实验中用以着色染色体(教材第一册P39)。
碱性染料容易让染色体(质)着色。
染色时间不能过长。
醋酸洋红
醋酸、洋红
 
配制:45%醋酸100ml,加洋红1g,煮沸(沸腾时间不超过30秒),冷却后过滤即成。
在“观察植物细胞有丝分裂” 实验中用以着色染色体(教材第一册P39)。
碱性染料容易让染色体(质)着色。
染色时间不能过长。
结晶紫
结晶紫
 
配制:将2g结晶紫溶于20ml体积分数为95%的酒精。
在“自生固氮菌的分离(选做)” 实验中用以给细菌着色(教材第三册P91)。
细菌细胞通常带负电荷,结晶紫染液是一种盐,电离时染料离子带正电,易与带负电荷的细菌结合而使细菌成紫色,易于在显微镜下进行观察。
染色时间不能过长,否则染色过深,不易观察细菌结构。
苏丹Ⅲ
苏丹Ⅲ
 
配制:将0.1g苏丹Ⅲ干粉溶于100ml体积分数为95%酒精中,待全部溶解后再使用。
在“生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定”实验中,作为鉴定生物组织中脂肪的存在(教材第一册P17)。
苏丹Ⅲ遇脂肪显橘黄色。
染色时间为2~3分钟。
苏丹Ⅳ
苏丹Ⅳ
 
配制:将0.1g苏丹Ⅳ干粉溶于50ml丙酮中,再加入体积分数为70%的酒精50ml,充分混合后即可使用。
在“生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定”实验中,作为鉴定生物组织中脂肪的存在(教材第一册P17)。
苏丹Ⅳ遇脂肪显红色。
苏丹Ⅳ染液与脂肪的亲和力比较强,所以染色时间应比较短,一般为1分钟左右。
亚甲基蓝
亚甲基蓝
1细胞的活体染色剂;
2水污染程度指示剂;
3氧气检测剂。
1一种蓝色染料,0.01%亚甲基蓝对细胞无毒害;
2亚甲基蓝(一种有机物小分子)在水中离解成亚甲基蓝的阳离子(呈蓝色)和氯离子(呈无色),亚甲基蓝阳离子可通过主动运输进入到细菌体内,在酶的作用下被细菌分解成无色的小分子,使蓝色褪去,褪色程度越大,说明细菌越多,水污染越严重。
3亚甲基蓝是氧化还原指示剂,在有氧的环境中蓝色褪去。
 
注:表中“教材”是指人教版(经全国中小学教材审定委员会2002年审查通过)教材。
二、练习巩固:
1、(2000年上海)鉴定蓖麻籽粒中的储存蛋白质,采用的实验步骤应包括(   )
  A.用质量分数为10%的盐酸解离液处理种仁薄片          B.用体积分数为95%的酒精溶液处理种仁薄片
C.用革兰氏碘液染色                                                          D.用亚甲基蓝染液染色
2、下列染液对细胞伤害不大的是(   )
  A.碘液                   B.苏丹Ⅲ          C.亚甲基蓝                      D.龙胆紫
3、向过氧化氢酶溶液中加入什么试剂显紫色(   )
  A.二苯胺               B.斐林试剂                C.苏丹Ⅳ             D.双缩脲试剂
4、下列能使染色体着色的是(   )
A.龙胆紫               B.碘液                        C.结晶紫                          D.醋酸洋红
5、下列关于二苯胺试剂说法正确的是(   )
  A.二苯胺可用来检测核酸的存在                                             B.二苯胺可用来检测脱氧核糖的存在
C.加入二苯胺后显紫色,就说明被检测溶液中含有DNA    D. 加入二苯胺后显蓝色,就说明被检测溶液中含有DNA
6、下列说法不正确的是(   )
  A.斐林试剂与班氏试剂都可用来鉴定还原性糖的存在         B.斐林试剂与班氏试剂鉴定还原性糖的原理完全相同
C.斐林试剂与班氏试剂的使用方法不同                                 D.班氏试剂是对斐林试剂的改良
7、下列试剂能使花生薄片显色的试剂有(   )
  A. 苏丹Ⅳ       B.双缩脲试剂                   C.碘液                       D.亚甲基蓝
8、下列试剂与被检测物质相遇显蓝色的是(   )
  A.碘液         B.双缩脲试剂                   C.二苯胺                          D.亚甲基蓝
9、下列试剂与被检测物质相遇显紫色的是(   )
  A. 苏丹Ⅳ       B.双缩脲试剂                   C.结晶紫                          D.伊红美蓝
10、亚甲基蓝能作为监测水污染情况的指示剂,原因有(   )
  A.亚甲基蓝是一种有机小分子物质                           B.亚甲基蓝在水中可离解为蓝色的亚甲基蓝阳离子和无色的氯离子
C.亚甲基蓝分子可被酶催化分解为无色小分子              D.亚甲基蓝可通过主动运输进入细胞内部,且低浓度的溶液对细胞无伤害
答案:1.BC              2.C        3.D        4.ACD          5.B         6.B         7.ABCD              8.ACD          9.BCD          10.ABCD
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